三七总皂苷对脑卒中的作用，三七总皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用的研究

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三七总皂苷对脑卒中的作用

从三七茎叶、花、果梗中得到的水提总皂苷结晶，在美国、日本、台湾、香港地区称为三七叶黄素。

通过对三七根、茎叶和花蕾化学成份系统研究表明；其地上部分的人参二醇类皂苷含量远高于地下部分。

三七茎叶中含有10多种皂苷和黄酮类成分，与目前临床上一些常用的心脑血管疾病改善药物相比，三七茎叶中含有的各种活性成分有着别具一格的作用机制。

三七茎叶中含有皂苷类与黄酮类在协同作用下具有神奇功效；扩张血管、增加血流量、改善心脑血管循环，在缺氧情况下保护脑和心肌细胞，延缓脑细胞死亡，修复大脑神经元。

同时，可以降低血中的甘油三酯，并提高密度脂蛋白含量、提高血红细胞超氧化物歧化酶的活性。

三七总皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用的研究

三七总皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用的研究 三七为五加科人参属植物三七Panaxn otoginseng(Bu rk。)F。H 。Chen的干燥根，是我国特产的药材。

传统医学中认为其具有散痕止痛、消肿活血的功效。

近年来临床研究中发现，三七对于多种原因造成的心肌损伤有保护作用，其活性成分三七皂苷(Pa naxr notoginsengsaponins， PNS)，在缺血性心脏病的改善中得到成功应用，其作用机制可能与提高心肌细胞抗氧化能力，改善细胞能量代谢有关。

由于 缺 血 性心脏病和阿霉素致心肌疾病都与细胞能量代谢紊乱有关，笔者推测三七皂苷可能对阿霉素致心脏损伤具有保护作用。

本研究采用阿霉素急性心脏毒性模型和离体培养的心肌细胞分别评价 三七皂苷的保护作用，同时观察了三七皂苷对阿霉素抗肿瘤活性的影响，为进一步扩大三七的临床应用提供依据 三七皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用实验准备 药物和试剂三七药材购自云南文山，由浙江大学药学院贺庆副教授鉴定，样品保存于浙江大学中药系。

三七皂苷(PNS )由本实验室提取。

经HPLC分析，PNS中人参皂苷Rb，，R g ，，R d ，Re 和三七皂苷R：的总含量约91%。盐酸多柔比星注射液，浙江海正药业股份有限公司生产，批号060904。

乳酸脱氢酶(lactated ehydrogenase，LD H)试剂盒(批号06060101)、肌酸激酶(cr eatinek inase， CK )试剂盒(批号07010101)、肌酸激酶同工酶(mbisoenzyme ofcreatinek inase， CK MB)试剂盒(批号06080101)均购于宁波亚太生物技术公司。

过氧化氢酶(catalase，CAT)试剂盒(批号20070302)、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase ， SOD)试剂盒(批号20070302)、谷胧苷肤(glutathionep eroxidase，G SHPx)试剂盒(批号20061220)均购于南京建成生物工程研究所。

DMEM完全培养基(批号1384657)，胎牛血清(批号613864)为Gibe。

公司产品。

超级新生牛血清(批号20070415)为SeRaBio公司产品。

1.2 动物及细胞清洁级ICR小鼠，雄性，体重(20 t2) g，由浙江省实验动物中心提供，合格证号：CSXK2003-0001。

大鼠心肌细胞H9CZ 、人红白血病细胞K562、人口腔上皮癌细胞KB、人乳腺癌细胞MCF一由中国科学院上海细胞所细胞库提供 三七皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用实验方法 2.1 动物分组、给药及造模40只小鼠随机分为5组，每组8只，分别为：正常对照组，阿霉素模型组，3个剂量的PNS干预组(25，50，100 mg·kg-‘)。

给药及造模方案：正常对照组以0.02mL“g-’每日灌胃给予生理盐水，在第5天腹腔注射等量生理盐水代替阿霉素；阿霉素模型组每日灌胃给予等量的生理盐水，第5天腹腔注射15 mg·kg一’盐酸阿霉素；PNS干预组造模前按0.02mL”g-’体积每日灌胃给予不同剂量的药物，连续5d，每天1次，第5天给药1h内腹腔注射15 mg·kg一’盐酸阿霉素，此后继续给药2d。

动物在检测前禁食12 h，不禁水。

2.2 动物血清及组织指标的测定造模后72 h，戊巴比妥麻醉动物，腹腔静脉取血；解剖取心脏，称重，加pH7 。4， 0。 01 m ol·L一’Tirs-HCI溶液，制成5%匀浆。

血清样品中LDH，CK，CKMB活力使用相应试剂盒按说明书方法测定。

5%组织匀浆使用考马斯亮蓝法确定其中蛋白含量，使用相应试剂盒按说明书方法测定SOD，CA T，GS H-PX的活性 2.3 心肌细胞培养及给药培养H9C Z细胞(37℃，饱和湿度，95%空气+5% C02，含10% FBS的DMEM培养基)至状态稳定，接种于%孔板上，每孔细胞量约为1 x 104个。

24 h后更换培养液，加入不同质量浓度(0，6.25，12.5，25，50，100 mg·L-1)的PNS，1 h后，加入10 pmol·L一’阿霉素或相等量的溶剂。

其 中，不含阿霉素和PNS的处理组作为正常对照组；仅含阿霉素，不含PNS的处理组作为模型组。

培养24h后，用MT 法在波长550 nm处测定吸光度值(A)表示细胞活力。

细胞的相对活力按以下公式计算：细胞相对活力(%)二PNS组(A)/正常对照组(A) x 100% 2.4 肿瘤细胞培养及给药为了评价PNS对阿霉素抗肿瘤活性的影响，采用三株人源肿瘤细胞，即MCF-7， KB及K562进行实验。

分别培养MCF-7，KB，K5 62细胞(37℃，饱和湿度，95%空气+5%C02，含10%超级新生牛血清的DMEM培养基)至状态稳定，接种于%孔板上，每孔细胞量2x10，个。

24 h后更换其培养液，加人不同质量浓度(0，6.2512。5，25，50，100 mg·L一’)的PNS，1 h后，加人0.1N，mol·L-’阿霉素。

其中，不含阿霉素和PNS的处理组作为正常对照组；仅含阿霉素，不含PNS的处理组作为阿霉素干预组；同时含有PNS和阿霉素的处理组为联合干预组。

各组含有等量的溶剂DMSO (0.1%)。

细胞培养48 h后，用MT 法在波长550nm处测定A。

细胞生长抑制率按照以下公式计算：

细胞生长抑制率(%)二(正常对照组A一药物处理组A)/正常对照组Ax100% 2.5 统计处理实验数据采用SPSS1 1.0 软件进 行分析，实验结果用it。

表示，组间比较用Dunnettt检验。

P< 0.05 为显著性差异。

三七皂苷对阿霉素致心肌损伤保护作用结果 3.1 对阿霉素致小鼠急性心肌损伤的影响动物实验中模型组心肌酶谱各项指标均大幅上升，与正常对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。

而PNS干预组(25，50，10 0m g“ kg -’)与模型组相比，各指标均明显下降。

中、高剂量组(50，100m g·kg-I)LDH，CK，CKMB与模型组相比均具有显著性差异(P<0.05)或非常显著差异(P<0.01)，下降幅度分别达到32.5%， 41.8%， 29.4%及44.2%，39.5%，36.0%。

说明PNS能减轻阿霉素对心肌组织的损伤心肌组织的SOD，CA T，GS H-PX的活性反映组织对抗氧应激的能力。

模型组各种抗氧化酶的水平均较对照组显著降低(P<。

。05)。

PNS干预组(25，50，100 mg ” kg-‘)与模型组相比，酶的活力有所增高，且显示一定的剂量依赖关系。

其中，中、高剂量组(50，100 mg " kg-’)各项酶活水平与模型组相比均存在显著性差异(P

三七总皂苷成为预防和改善心血管疾病的基础药物

三七总皂苷成为预防和改善心血管疾病的基础药物 心脑血管疾病仍为当今世界第一大病种，心血管病药物也理所当然地成为世界医药市场上排名第一的药品大类，也是比较经典的一类药物，心血管药物与抗生素和抗肿瘤药物不同，各种药物使用比较平均，在驱动药品市场增长的药物中很少有心血管药物的身影，但市场相对稳定。

因此，心血管药物也是世界各大医药公司研发的热点 。

心血管疾病是全世界导致人类死亡的首位疾病。

世界卫生组织估计每年有1750万人死于心血管疾病和脑卒中（占所有死亡的1/3），而到2030年，这个数字将升至2420万人，也就是说，32.5%的死亡是由心血管疾病导致。

我国每年死于心血管疾病者近300万人，而患有各类心血管疾病危险因素的人群数量也已经过亿。

目前，人口老龄化，生活水平的日益提高使得我国正进入心血管疾病爆发的“窗口期”，拥有心血管药物庞大的消费群体 。

三七抗心脑血管疾病出类拔萃 国内医药专家认为：中药制剂具有副作用较小、活血化瘀疗效显著等优点，适合长期服用，故植物提取物制剂引领我国心脑血管病药物市场也是顺理成章之事。

而广大病人更关心的是药品的疗效和价格，在这两方面，中药制剂无疑比西药更具竞争力。

在上述5大类植物心血管制剂中开发最晚、也是最具市场前景的药物为三七类制剂。

近年来，三七的研究开发工作已取得重大进展。

三七属于五加科植物的根，美国科学家称其为“诺托人参”（Panaxnotoginsen），原来在中药里三七仅仅作为止血剂使用。

最新药理研究证实：三七皂苷有多种药理作用，其中包括改善脑动脉硬化症、缺血性脑损伤、脑梗塞、脑出血等等。

尤其三七皂苷的抗血小板作用优于现有多种化学合成抗血小板药物。

根据上述新发现，国内药企已开发出包括血塞通在内的多种新型心脑血管病药物，配合强有力的学术营销手段，三七皂苷类制剂很快成为我国医院临床改善心血管疾病的常用药物品种，销量直线上升。

中国医药商业协会不久前公布的统计资料显示，2008年，我国医院中药类心血管改善剂中，血栓通、血塞通和三七通舒这3只三七皂苷制剂的销量已分别占医院中药类心血管改善剂销量的60%、34%和4.8%。

尤其是冻干粉剂型的血栓通注射剂更受医院的欢迎，其销售额已占医院中药类心血管制剂销量的6成。

这表明传统中药一旦加工成现代化制剂可使其脱胎换骨，从而达到销售更上一层楼的境界从药物销售城市以广州和北京占据首位，2006年他们所占份额将近50%。

发达城市的更注重用药的安全，选用副作用较小的中药。

众所周知，中药是我国的国粹，中药类心血管病药物无疑拥有广阔市场空间和良好的发展前景。

包括丹参滴丸和三七皂苷类中药心血管病新制剂已走出国门，进入包括欧美等发达国家的市场，并在国际市场上大放异彩。

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